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企業(yè)動(dòng)態(tài)
詳細(xì)介紹酶標(biāo)儀酶免分析七大步驟
更新時(shí)間：2016-04-27 點(diǎn)擊次數(shù)：2332次
酶標(biāo)儀是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的儀器又稱微孔板檢測(cè)器。可簡(jiǎn)單地分為半自動(dòng)和全自動(dòng)2大類，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一個(gè)比色計(jì),即用比色法來(lái)進(jìn)行分析。 測(cè)定一般要求測(cè)試液的終體積在250μL以下，用一般光電比色計(jì)無(wú)法完成測(cè)試，因此對(duì)酶標(biāo)儀中的光電比色計(jì)有特殊要求。
1 、將標(biāo)準(zhǔn)品和樣品對(duì)應(yīng)的微孔編號(hào)，每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品做雙孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位置。
2 、在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入 50µl 各標(biāo)準(zhǔn)品溶液，酶標(biāo)儀在各樣品孔中加入 50µl 樣品溶液。
3 、在所有孔中加入 50µl 的抗體工作液，用蓋板膜封板，輕輕振蕩混勻， 25 ℃環(huán)境中避光反應(yīng) 30 分鐘。
4 、小心揭開(kāi)蓋板膜，甩干孔中液體，用稀釋好的洗滌液（ 250μl/ 孔）充分洗滌微孔板 3 次，在吸水紙上拍干（拍干后未清除的氣泡可用未使用過(guò)的槍頭戳破）。
5 、酶標(biāo)儀在所有孔中加入 100µl 的酶標(biāo)二抗，酶標(biāo)儀用蓋板膜封板，輕輕振蕩混勻， 25 ℃環(huán)境中避光反應(yīng) 30 分鐘。取出酶標(biāo)板，按步驟 4 洗板 5 次。
6 、洗滌程序完成后，立即用微量移液器在每個(gè)微孔中先加入 50µl 底物液 A ，再加 50µl 底物液 B ，輕微晃動(dòng)反應(yīng)板使之*混勻， 25 ℃環(huán)境避光顯色 15 分鐘 ( 在顏色淺的情況下可適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間，但總顯色時(shí)間不要超過(guò) 30 分鐘 ) 。
7 、每孔中加入 50µl 終止液，輕輕晃動(dòng)使之*混勻，在 450nm （建議使用雙波長(zhǎng) 450/630nm ）下檢測(cè)吸光度，結(jié)果在 5 分鐘內(nèi)讀取。
